kolónová chromatografia
kolónová chromatografia — druh chromatografie so stacionárnou fázou umiestnenou v chromatografickej kolóne. Stacionárna fáza v tuhom skupenstve tvorí stĺpec náplne v trubici (kolóne) alebo tenkú vrstvičku na vnútornej stene tenkej kapiláry, stacionárna fáza v kvapalnom skupenstve je zakotvená na tuhom nosiči v trubici (kolóne) alebo na stene kapiláry. Mobilná fáza môže byť plynná (→ plynová chromatografia) alebo kvapalná (→ kvapalinová chromatografia). Kvapalinová kolónová chromatografia s tuhou náplňou kolóny sa nazýva aj stĺpcová. Vzorka sa v úzkej zóne dávkuje na začiatok kolóny. Separácia je založená na rôznej afinite separovaných látok k pohyblivej a nepohyblivej fáze. K základným parametrom (→ elučné charakteristiky) charakterizujúcim jednotlivé separované zložky patria elučný čas \(t_R\) a elučný objem \(V_R\) (pri konštantnom objemovom prietoku \(F_m\) mobilnej fázy platí \(V_R =F_m t_R\)), redukovaný elučný čas \(t_R^\prime\) a redukovaný elučný objem \(V_R^\prime\). Pretože plyny sú stlačiteľné, v prípade plynovej chromatografie sa redukovaný elučný objem prepočítava na čistý elučný objem \(V_N\) vynásobením korekčným faktorom stlačenia nosného plynu (kompresibilitným faktorom). Zo základných parametrov sa vypočítavajú všeobecnejšie relatívne charakteristiky, napr. kapacitný pomer \(k\) a zbrzďovací faktor \(R\). Separáciu analytov (zložky 1 a 2 separované za rovnakých podmienok) charakterizuje elučný pomer \(\alpha=r_{2,1}=\frac{t^\prime_{R,2}}{t^\prime_{R,1}}=\frac{k_2}{k_1}\) (\(k_2>k_1\)) vyjadrujúci relatívnu retenciu a selektivitu. Separačnú účinnosť kolóny charakterizuje počet zložiek, ktoré možno daným systémom rozdeliť, a najčastejšie sa vyjadruje tzv. píkovou kapacitou, počtom teoretických priehradiek alebo rozlišovacím faktorom. Na optimalizáciu podmienok separácie sa využíva aj van Deemterova rovnica a jej modifikácie. V kvalitatívnej analýze sa využívajú aj elučné indexy, ktoré sú v kvapalinovej chromatografii založené na redukovaných elučných časoch polyaromatických uhľovodíkov a v plynovej chromatografii na homologickom rade alkánov (→ Kovátsove indexy). Pri menšej zrnitosti náplní chromatografických kolón je potrebné pohyb mobilnej fázy urýchľovať zvýšením tlaku, čo zabezpečujú prístroje na vysokoúčinnú kvapalinovú chromatorafiu (HPLC).